تخليق الببتيد: أهمية التنميط الشوائب في الببتيدات العلاجية

الببتيدات العلاجية هي فئة فريدة من العقاقير الصيدلانية الموضوعة بين الأدوية التقليدية ذات الجزيئات الصغيرة والأدوية ذات الجزيئات الكبيرة. ينمو سوق العقاقير الببتيدية بشكل أسرع بسبب العديد من المزايا المتأصلة المتعلقة بالخصوصية والفعالية والسلامة وإمكانية التوليف بالطرق الكيميائية و / أو البيولوجية. من الضروري دراسة ملف الشوائب للببتيد العلاجي حيث تظهر الشوائب أثناء أي مرحلة من مراحل تخليق الببتيد ، إما من مواد البداية أو عملية التصنيع أو أثناء التخزين.

هذه المدونة هي الأولى في سلسلتها وتطلعك على أهمية تحديد الشوائب أثناء التخليق الكيميائي للببتيدات.

تخليق الببتيد

تتكون الببتيدات من 2-50 حمض أميني مرتبطة بمجموعات أميد. يسمح التركيب الكيميائي بتحضير الببتيدات خارج الخلية الحية. تشمل أمثلة الأدوية الببتيدية الاصطناعية هرمونات مثل الأوكسيتوسين, الكالسيتونين, ليراجلوتايد, Octreotide, وما إلى ذلك.

يتم تصنيع الببتيد الكيميائي بطريقتين

• تخليق الببتيد ذو الطور الصلب
• تخليق الببتيد السائل

تخليق الببتيد ذو الطور الصلب

إنها الطريقة الأكثر استخدامًا وفعالية وسرعة لتخليق الببتيدات. يتضمن تخليق الببتيد في المرحلة الصلبة (SPPS) تفاعل اقتران للأحماض الأمينية يتكون من بقايا الأحماض الأمينية ذات السلسلة الجانبية المحمية المرتبطة بالدعم البوليمري غير القابل للذوبان (الراتنج).

يتم ربط الطرف C للحمض الأميني الأولي تساهميًا بدعامة بوليمرية غير قابلة للذوبان. بعد إزالة مجموعة الحماية N (α) من آخر بقايا حمض أميني ، يتم إدخال N (α) - الأحماض الأمينية المحمية إلى الحمض الأميني الراسخ. بعد ذلك ، تتضمن عملية تنقية لإزالة المنتجات الثانوية القابلة للذوبان. المجموعات المستخدمة لحماية N (α) - حمض أميني هي 9-فلورينيل ميثوكسي كاربونيل (Fmoc) أو ثلاثي بوتوكسي كربونيل (boc). تكرار نزع الحماية ودورة الاقتران يعطي الببتيد المطلوب. يتم شق المنتج المثبت من دعامة البوليمر ، ويطلق الببتيد في المحلول.

تقوم SPPS بإعداد معظم الببتيدات من 50 سلسلة من الأحماض الأمينية. يمكن للآلات المؤتمتة بالكامل تحضير كميات صغيرة من الببتيدات بسرعة. علاوة على ذلك ، يوفر SPPS بمساعدة الميكروويف ببتيدات عالية الجودة.

تخليق الببتيد السائل

إن تخليق الببتيد الذي يحدث في المحلول هو تخليق الببتيد في الطور السائل. عادة ما تستخدم مجموعات حماية Boc أو Z-amino. خطوة التنقية النهائية في تخليق الببتيد في المرحلة السائلة أبسط من SPPS. يعطي تخليق الببتيدات على نطاق واسع لسلاسل أقصر عائدًا جيدًا بهذه الطريقة.

الشوائب المتكونة أثناء تخليق الببتيد

تشمل الشوائب المحتملة أثناء العملية التركيبية للببتيد العلاجي

• تسلسل الأحماض الأمينية المقطوعة
• تسلسل الحذف
• تسلسلات نزع الحماية غير مكتملة
• تسلسل معدل بسبب انقسام الببتيد
• توصيف الأحماض الأمينية

تنشأ الشوائب مثل الأيونات المضادة للببتيد وثلاثي فلورو أسيتات من طرق التنقية أو SPPS. تؤدي تفاعلات السلسلة الجانبية للأحماض الأمينية الناتجة عن تفاعلات الإزالة والأكسدة والتحلل المائي إلى تكوين شوائب. علاوة على ذلك ، يمكن أن تؤدي شوائب الببتيد إلى التخزين بسبب آليات التحلل مثل β- القضاء وتكوين السكسينيميد. التفاعلات الدوائية مع السواغات تولد أيضًا شوائب مرتبطة بالببتيد.

تنقية الببتيدات

تعد تنقية الببتيد الاصطناعي أمرًا بالغ الأهمية حيث يمكن أن تؤثر الشوائب على الفعالية العلاجية للدواء. تعتبر تنقية الببتيدات الاصطناعية بواسطة HPLC ذو المرحلة العكسية (RP-HPLC) وكروماتوجرافيا التبادل الأيوني منهجيات شائعة. أيضًا ، يتم استخدام كروماتوغرافيا التخلل الهلامي (GPC) وكروماتوغرافيا السوائل فوق الحرجة (SFC) كطرق تكميلية.

السيطرة على شوائب الببتيد

هناك العديد من التقنيات المستخدمة في السيطرة على شوائب الببتيد. يفصل الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC) الشوائب ويقيسها. يساعد التحليل الطيفي الكتلي عالي الدقة اللوني السائل (LC-HRMS) في تحديد وتوضيح شوائب الببتيد ذات الصلة بنيوياً. توصي الوكالات التنظيمية باتباع نهج متعامد باستخدام تقنيات تحليلية حساسة مثل UHPLC-HRMS مع طرق HPLC / UHPLC القياسية لإنشاء ملف تعريف الشوائب لعقار الببتيد. تعتبر الشوائب المرتبطة بالببتيد أمرًا بالغ الأهمية ، ليس فقط للمكونات الصيدلانية الفعالة (APIs) ولكن أيضًا لمنتجات الأدوية النهائية. وفقًا لإرشادات إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (US-FDA) ، أثناء تقديم ANDA للببتيدات الاصطناعية العامة المقترحة ، يجب ألا يكون مستوى الشوائب المرتبطة بالببتيد في الببتيدات الاصطناعية العامة أكبر من المستوى الموجود في RLD (الدواء المدرج في القائمة المرجعية). يعد التحكم في شوائب الببتيد أمرًا حيويًا لإثبات سلامة وفعالية عقار الببتيد الاصطناعي.

DAICEL تقدم أنواعًا مختلفة من معايير الشوائب عالية الجودة للببتيدات الاصطناعية وشركاء مع مصنعي العقاقير الببتيدية في جميع أنحاء العالم. يوفر فريق تصنيع الببتيد المخصص لدينا حلولًا موثوقة لشوائب الببتيد المعقدة والببتيدات المستقرة المسمى بالنظائر.

DAICEL يستخدم SPPS الأوتوماتيكي الأكثر حداثة ، والتنقية المتقدمة ، والتقنيات التحليلية أثناء تخليق الببتيد ، متبوعًا بإصدار شهادة تحليل من منشأة مراقبة الجودة المتوافقة مع cGMP.

بالإضافة إلى ذلك، DAICEL يقدم توصيفًا فيزيائيًا كيميائيًا ، وتطوير اختبار حيوي قائم على الخلايا ، وتطوير العمليات ، ونقل التكنولوجيا للببتيدات العلاجية.

وفي الختام

سيؤثر تلوث عقاقير الببتيد بالشوائب على جودة وفعالية الببتيدات ، وبالتالي فإن دراسات ملف الشوائب مهمة جدًا. يمكن لشوائب الببتيد أن تقدم حواتم مناعية داخل تسلسل الأحماض الأمينية للببتيد وقد تؤدي إلى استجابات مناعية غير مرغوبة ضد عقار الببتيد. ومن ثم ، فإن معايير النجاسة جيدة التوصيف ضرورية للحكم على جودة الأدوية الببتيدية. توفر Daicel خدمات تصنيع الببتيد المخصصة والموثوقة لمطوري ومصنعي الأدوية الببتيدية العلاجية.

يرجى قراءة مدوناتنا الأخرى في سلسلة تخليق الببتيد لمعرفة المزيد عن شوائب الببتيد.

إذا كنت تبحث عن خدمات تصنيع الببتيد ، فتواصل مع متخصصي Daicel اليوم! فقط إسقاط في تفاصيل الاتصال الخاصة بك ونحن سوف نعود اليكم.